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单克隆抗体制备

作者:上海远慕生物科技有限公司 2016-08-08T00:00 (访问量:2248)

为满足客户对抗目标靶标物单克隆抗体的迫切需求,博奥森单抗制备团队经过多年的系统深入研究,发现了外源细胞因子对杂交瘤形成与生长调节规律,提出 了一种全新技术方案,通过探明人类干细胞因子bFGF、HFCS对目标多肽以及靶标蛋白阳性杂交瘤形成与生长调节规律,创建了杂交瘤细胞株半固体干细胞培 养基-梯度筛选法(简称"两步筛选法"),突破了常规HAT、HT培养筛选法阳性率低、随机性大的局限。单克隆抗体制备服务最快可在100天内完成单抗制 备过程,并且保证为客户提供2个阳性克隆以及高亲和力的抗体产品。

 

上海远慕生物公司可根据客户的不同需要提供经济、快速而可靠的单克隆抗体制备的完整解决方案,本项技术服务包括:

  - Balb/c纯系小鼠免疫;

  - 脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞的融合;

  - 抗体产生细胞的ELISA筛选;

  - 抗体产生细胞的亚克隆与扩增;

  - 指定细胞克隆的体外培养或腹水瘤接种法生产单克隆抗体。

一、单抗制备服务周期、制备步骤、制备说明:        
服务周期(天)    制备步骤    制备说明                            
1    一次免疫    每种抗原免疫5只Balb/c小鼠,抗原与弗氏完全佐剂乳化        

22             二次免疫    抗原与弗氏不完全佐剂乳化      
             
43             三次免疫    抗原与弗氏不完全佐剂乳化;

                                    免疫一周后取血+ELISA检测效价。  
     
57            加强免疫    单独抗原直接免疫;

                                   三天后采血(血清做阳性对照),取脾。  
             
60            细胞融合    SP2/0骨髓瘤细胞与小鼠(ELISA效价较高)的脾细胞融合      
         
70-100    HAT选择杂交瘤细胞    ELISA效价检测筛选阳性细胞克隆
                                杂交瘤细胞的亚克隆
                                至少进行2~4次杂交瘤细胞的亚克隆,直至细胞上清的ELISA结果阳性率达到100%,将完成细胞建株    。    

115-120    亚类鉴定    对杂交瘤细胞株所分泌的抗体进行亚类测定      
             
120           冻存细胞株    每种抗原提供2株杂交瘤细胞            

121-140    制备腹水并纯化    接种细胞制备腹水、Protein A/G纯化   

 

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