
我们实验中,标本中大多数神经激素、肽类物质,以及蛋白质为水溶性,在用于研究之前,常需固定,即使其凝固以降低其水溶性。甲醛能与蛋白质的氨基反应,使蛋白质凝固,因此在医药上可做检验时的组织固定剂、以及防腐剂等。而在固定剂中,最常用的是多聚甲醛。
多聚甲醛染色前固定
做实验的过程中,因为排不上实验仪器、希望标本能够较长时间存放等等原因,很多实验人员习惯性都会用4%多聚甲醛预先固定标本。也有为了灭活标本里面可能存在的微生物(细菌、病毒等),起到安全保障作用;或者是做胞内染色前的准备,进行固定细胞 。
然而,可能很多人忽视了一点,就是如果在染色之前用多聚甲醛固定标本,细胞表面有些位点在固定后构象发生改变,使得抗体无法结合产生假阴性,也可能由于固定作用,导致其它位点产生非特异性结合(假阳性)。
因此,知道哪些抗体染色前不能预固定,十分重要。贴心的技术人员帮我们做了一系列测试,下面两张表,可以看的出来,大多数不能固定的抗体都是趋化因子受体类目的,这类抗体,大家在实验中要注意不能先固定后染色。
—— 人源样本——
 
| 
             实验样本 
             | 
            
             克隆号 
             | 
            
             标记物 
             | 
            
              是否适合固定 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             L263G8 
             | 
            
             CCR8 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             1712380 
             | 
            
             CCR10 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             UCHT1 
             | 
            
             CD3 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             OKT3 
             | 
            
             CD3 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             HIT3a 
             | 
            
             CD3 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             SK7 
             | 
            
             CD3 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             OKT4 
             | 
            
             CD4 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             RPA-T4 
             | 
            
             CD4 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             UCHT2 
             | 
            
             CD5 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             BL-CD6 
             | 
            
             CD6 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             CD7-6B7 
             | 
            
             CD7 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             RPA-T8 
             | 
            
             CD8 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             HIT8a 
             | 
            
             CD8 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             HI111 
             | 
            
             CD11a 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             ICRF44 
             | 
            
             CD11b 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 单核细胞 
             | 
            
             3.9 
             | 
            
             CD11c 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             WM15 
             | 
            
             CD13 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 单核细胞 
             | 
            
             M5E2 
             | 
            
             CD14 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             HCD14 
             | 
            
             CD14 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             W6D3 
             | 
            
             CD15 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 粒细胞 
             | 
            
             HI98 
             | 
            
             CD15 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             3G8 
             | 
            
             CD16 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             TS1/18 
             | 
            
             CD18 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             HIB19 
             | 
            
             CD19 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             EBVCS-5 
             | 
            
             CD23 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             ML5 
             | 
            
             CD24 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             BC96 
             | 
            
             CD25 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             O323 
             | 
            
             CD27 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             M-T271 
             | 
            
             CD27 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             CD28.2 
             | 
            
             CD28 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             WM59 
             | 
            
             CD31 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             581 
             | 
            
             CD34 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             HIT2 
             | 
            
             CD38 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             5C3 
             | 
            
             CD40 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             HI30 
             | 
            
             CD45 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             CC2C6 
             | 
            
             CD47 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             CBR-IC3/1 
             | 
            
             CD50 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             MEM-188 
             | 
            
             CD56 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             HCD56 
             | 
            
             CD56 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             DREG-56 
             | 
            
             CD62L 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 单核细胞 
             | 
            
             IT2.2 
             | 
            
             CD86 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 粒细胞 
             | 
            
             S5/1 
             | 
            
             CD88 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             DX2 
             | 
            
             CD95 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             HCD99 
             | 
            
             CD99 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             A019D5 
             | 
            
             CD127 (IL-7Rα) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             Ber-ACT35 
             | 
            
             CD134 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             SE5A5 
             | 
            
             CD172a/b 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             LSB2.20 
             | 
            
             CD172g 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 粒细胞. 淋巴细胞 
             | 
            
             8F1/CXCR1 
             | 
            
             CD181 (CXCR1) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 粒细胞 
             | 
            
             5E8/CXCR2 
             | 
            
             CD182 (CXCR2) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             G025H7 
             | 
            
             CD183 (CXCR3) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             12G5 
             | 
            
             CD184 (CXCR4) 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 粒细胞 
             | 
            
             500000000 
             | 
            
             CD193 (CCR3) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             L291H4 
             | 
            
             CD194 (CCR4) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             T21/8 
             | 
            
             CD195 (CCR5) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             HEK/1/85a 
             | 
            
             CD195 (CCR5) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             J418F1 
             | 
            
             CD195 (CCR5) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             G034E3 
             | 
            
             CD196 (CCR6) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             G043H7 
             | 
            
             CD197 (CCR7) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             L053E8 
             | 
            
             CD199 (CCR9) 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             C1.7 
             | 
            
             CD244 (2B4) 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             11C1 
             | 
            
             CD268 (BAFF-R) 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             EH12.2H7 
             | 
            
             CD279 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             TL2.1 
             | 
            
             CD282 (TLR2) 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             2A9-1 
             | 
            
             CX3CR1 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血, 淋巴细胞 
             | 
            
             K0124E1 
             | 
            
             CX3CR1 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             L243 
             | 
            
             HLA-DR 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             裂解全血 
             | 
            
             MHM-88 
             | 
            
             IgM 
             | 
            
             No 
             | 
        
—— 小鼠样本 ——
 
| 
             实验样本 
             | 
            
             克隆号 
             | 
            
             标记物 
             | 
            
             是否适合固定 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             1B1 
             | 
            
             CD1d 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             17A2 
             | 
            
             CD3 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             145-2C11 
             | 
            
             CD3 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             RM4-5 
             | 
            
             CD4 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             GK1.5 
             | 
            
             CD4 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             RM4-4 
             | 
            
             CD4 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             53-7.3 
             | 
            
             CD5 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             53-6.7 
             | 
            
             CD8a 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             YTS156.7.7 
             | 
            
             CD8b 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             53-5.8 
             | 
            
             CD8b.2 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠骨髓 
             | 
            
             M1/70 
             | 
            
             CD11b 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             N418 
             | 
            
             CD11c 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             93 
             | 
            
             CD16/32 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             6D5 
             | 
            
             CD19 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             7000000000 
             | 
            
             CD21/35 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             B3B4 
             | 
            
             CD23 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             M1/69 
             | 
            
             CD24 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             LG.3A10 
             | 
            
             CD27 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             37.51 
             | 
            
             CD28 
             | 
            
             No 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             HMβ1-1 
             | 
            
             CD29 
             | 
            
             Yes 
             | 
        
| 
             C57BL/6 小鼠脾脏 
             | 
            
             MEC13.3 
             | 
            
             CD31 
             | 
            
                                     杭州联科生物技术股份有限公司 商家主页地 址: 浙江省杭州市拱墅区祥园路108号智慧信息产业园三期三号楼13层 联系人: 电 话: 4006721600 传 真: 4006721600 Email:network@liankebio.com 相关咨询新品速递 | 前列腺素E2(PGE2)ELISA Kit (2019-07-15T09:52 浏览数:10725) 做流式有一套|你知道的Treg,答题抽奖好礼不停 (2019-03-11T09:42 浏览数:12376) 联科生物喊你吃年夜饭啦! (2019-01-25T13:37 浏览数:14168) 在皮氏培养皿中生长的血管与人类血管非常相似 (2019-01-23T15:04 浏览数:12893) Human ELISA Kit 推荐:人降钙素ELISA试剂盒 (2019-01-10T14:35 浏览数:12433) 联科生物新品:妊娠研究相关试剂盒 (2019-01-09T17:05 浏览数:13710) 联科生物第四季ELISA大赛——杭州站 (2019-01-04T15:33 浏览数:13150) 全血 Foxp3 实验操作步骤 (2018-12-10T09:52 浏览数:16461) 人 Treg 试剂盒操作步骤 (2018-12-06T10:03 浏览数:15706) 流式胞内染色步骤 (2018-11-12T11:34 浏览数:15580) ADVERTISEMENT 
                        
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