免疫组化常见问题（精选）-分析方法-资讯-生物在线

固定液如何选择？

固定液一般建议选择4%的多聚甲醛或者10%的中性福尔马林。但对于有些特殊组织比如眼球、脂肪等，有些公司有专门固定液，需要提前询问是否影响抗原。

选择哪种抗原修复方法？

常用的修复方式为热修复和胰蛋白酶消化修复，应用热修复时应注意所用的缓冲溶液的pH值，常用pH值为柠檬酸盐（pH 6.0）和EDTA（pH 9.0）。

在蛋白酶消化抗原修复中，按照我们的经验，蛋白酶K效果最佳。

另外，抗原修复之前建议做一张HE染色，以检测抗原（组织）结构是否清晰、完整；有无人为损伤；脱蜡是否彻底等。具体选择哪种抗原修复方法，请参考一抗说明书。

一抗孵育条件如何选择？

选择4度过夜还是选择37度一小时？建议根据抗体说明书进行实验。如果说明书中未提及，建议选择4度过夜方式进行实验。

蜡块及白片应该如何储存？

蜡块可存放于室温，如果条件允许也可存放于4度，注意防潮。白片的储存对染色的影响目前尚不明确，因此最好的做法是在使用前新鲜制备玻片。如果白片必须存放，建议在4度进行保存；不建议在存放前烘烤白片。

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