货号:BC0170
规格:50T/24S
产品内容:
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体15 mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存,用时加27mL蒸馏水配制成悬浊液,使用前充分摇匀;
试剂三:液体160μL×1支,4℃保存;
试剂四:液体11mL×1瓶,4℃保存。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
产品说明:
SOD(EC 1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜,后者在560nm处有吸收;SOD可清除O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。
操作步骤:
一、样品的前处理:
1. 细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500-1000:1 的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10 的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3. 血清(浆)样品:直接检测。
二、测定步骤:
1. 分光光度计预热30min以上,调节波长至560nm,蒸馏水调零。
2. 测定前将试剂一、二和四37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴5min以上。
3. 样本测定(在EP管中加入下列试剂)
4.
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 空白管1 | 空白管2 |
试剂一(μL) | 240 | 240 | 240 | 240 |
试剂二(μL) | 510 | 510 | 510 | 510 |
试剂四(μL) | 180 | 180 | 180 | 180 |
样 品 (μL) | 90 | 90 |
|
|
蒸馏水(μL) 地 址: 北京市通州区中关村科技园区通州园金桥科技产业基地景盛南四街15号85A三层 联系人: 索莱宝-龚思雨 电 话: 010-50973130 传 真: Email:3193328036@qq.com
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