酵母双杂交系统是一种鉴定蛋白质相互作用的研究方法，是基于对酵母转录因子GAL4的性质研究之上。GAL4包括两个功能结构域：一是与DNA上游激活序列(Upstream activating sequence UAS)结合的DNA结合结构域(binding domain, BD), 该结构域位于N端1-174位氨基酸残基区段；另一个是转录激活结构域(activation domain, AD)，该结构域位于C端768-881位氨基酸残基区段。这两个功能结构域是两个结构相互分离，功能又相互独立。一般情况下，单独的BD可以和UAS结合但并不引起转录，单独的AD则不能与UAS结合，只有当BD与AD分别表达的融合蛋白由于相互作用而导致两者在物理空间上相互接近时，BD与AD才能与UAS结合从而引起启动子下游基因的转录。
酵母双杂交主要功能
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发现新的与已知蛋白质互作的蛋白质；
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§
确认两个蛋白质之间的相互作用；
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§
鉴定参与蛋白质相互作用的区域；
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酵母双杂交技术优势
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真实：蛋白质互作发生在酵母细胞内，反应互作真实水平；
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灵敏：可检测微弱和短暂的蛋白质互作作用；
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§
操作简单：无需蛋白质抽提、纯化等繁琐步骤；
§
§
通量大，可构建文库，一次性完成数万蛋白质相互作用的筛选；
§
§
结果直观：通过蓝白斑筛选可以直观地找出有互作蛋白的阳性克隆。
§
酵母双杂交定制服务
文库构建（周期：4-6周）
项目流程：
样本选择：
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样品类型 |
样品需求 |
保存条件（℃） |
运输条件 |
备注 |
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动物组织 |
＞ 0.5 g |
-80 |
干冰 |
样本需标准清楚名称，分类等唯一信息。 |
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贴壁/悬浮细胞 |
＞1* 107细胞 |
-80 |
干冰 |
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种子 |
＞ 1g |
-80 |
干冰 |
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植物组织 |
＞ 1g |
-80 |
干冰 |
交付标准：
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产品名称 |
交付标准 |
储存条件 |
备注 |
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酵母工作液甘油菌 |
＞100管(1 m/管) |
-80 ℃ |
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筛选用载体套装 |
1套 |
-20 ℃ |
扩繁保存 |
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筛库用酵母菌株甘油菌 |
1套 |
-80 ℃ |
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建库项目报告 |
1份 |
- |
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文库筛选（周期：4-6周）
项目流程：
交付标准：
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产品名称 |
交付标准 |
储存条件 |
备注 |
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构建好的BD载体 |
1管 |
-20 ℃ |
公司构建 |
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阳性克隆酵母菌液 |
根据具体项目结果进行交付 |
-80 ℃ |
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阳性克隆质粒 |
根据具体项目结果进行交付 |
-20 ℃ |
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筛选项目报告 |
1份 |
-- |
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互作验证（周期：2-3周）
项目流程：
交付标准：
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产品名称 |
交付标准 |
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验证结果报告 |
1份 |
翌圣酵母双杂定制服务-技术优势
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利用mRNA来建库。采取总RNA纯化出mRNA的方式来建库，排除了样本中的核糖体RNA的污染，增加了筛选样本的有效性；大多数公司是采用总RNA来扩增建库的；
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实验设计严谨，保证阳性率。全程设置了严格的阳性对照，过程控制达到阳性对照的标准才会继续往下实验，如果建库过程达不到阳性对照水平是不收取建库的费用的。在筛选的过程中，同时采用了从松弛型筛选到严谨型筛选和从严谨型筛选到松弛型筛选两条路线尽最大的可能保证筛选到阳性结果。
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团队经验丰富。研发团队成员深耕酵母杂交技术领域十多年，拥有丰富的筛选经验；
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售前售中高效响应。每个项目，由专业技术支持全程跟进，及时对接项目进度及解答售前问题；
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贴心售后。赠送配套的筛库载体菌株、筛库完整方案和售后指导。根据客户要求，提供CNS文章级别的结果图片。
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相关产品上新
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产品名称 |
规格 |
货号 |
价格 |
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酵母质粒提取试剂盒 |
50T/100T |
300/520 |
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核蛋白酵母双杂交试剂盒 |
4T |
8775 |
上新优惠活动
定制服务：活动期间，订购翌圣酵母双杂定制服务，即送订单金额×5%的酵母质粒提取试剂盒(70201ES)或相关分子试剂；
核蛋白酵母双杂交建库试剂盒(70202ES)：活动期间，订购该产品可享目录价8折，再送50T 酵母质粒提取试剂盒(70202ES)。
活动时间：即日起至2023年12月31日。
※该活动所有解释权归翌圣生物科技（上海）股份有限公司所有。
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筛选底物 |
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Aureobasidin A(AbA) 金担子素A |
筛选抗生素 |