2D-DIGE蛋白质组学，即二维差异凝胶电泳（Two-Dimensional Differential Gel Electrophoresis）蛋白质组学，是一种高分辨率的蛋白质分离技术，其基础是传统的二维凝胶电泳（2-DE），结合荧光染料标记实现多样本的同步分析。2D-DIGE蛋白质组学通过将蛋白质混合物在等电聚焦和SDS-PAGE双重分离后，使样本在同一凝胶上同时进行分辨和定量。这种方法独特地将样本标记在不同的荧光波长下，使得多个样本可以在同一凝胶上进行分离并进行实时比较，极大地提高了实验的准确性和可重复性。相比传统2-DE，2D-DIGE蛋白质组学在检测蛋白质差异表达方面具备更高的灵敏度和准确性，因此该技术被广泛应用于许多领域。例如，在癌症研究中，通过比较肿瘤组织与正常组织的蛋白质表达谱，可以发现与肿瘤发生和进展相关的差异蛋白质，从而帮助识别潜在的癌症生物标志物。此外，2D-DIGE蛋白质组学还被应用于研究神经退行性疾病、心血管疾病、代谢综合征等多种疾病的发病机制和诊断标志物开发。药物研究中，2D-DIGE技术被用于评估药物对细胞或组织蛋白质组的影响，揭示药物的生物学作用机制。

在2D-DIGE蛋白质组学实验中，样本制备和染料标记是两个关键步骤。样本制备包括蛋白质的提取和纯化，通常需要根据实验目的选择合适的缓冲系统以保持蛋白质的稳定性和活性。染料标记阶段，使用不同的荧光染料对蛋白质样本进行标记，通过优化染料用量和标记条件，确保标记的均一性和定量性。完成标记后的蛋白质样本进行等电聚焦和SDS-PAGE分离，随后通过荧光扫描仪对凝胶进行成像，以获得高分辨率的蛋白质分离图谱。2D-DIGE蛋白质组学数据分析通常借助专用的软件进行，主要涉及图像的匹配、差异分析、统计学验证等步骤。在实验结果中，研究人员可以通过软件工具识别显著变化的蛋白质斑点，并利用质谱鉴定技术进一步确定其分子身份，这样便可以从更深层次理解蛋白质的功能和生物学意义。

2D-DIGE蛋白质组学在实际操作中可能会出现一些问题。例如，2D-DIGE在分辨复杂样品中低丰度蛋白质时存在局限性。高丰度蛋白可能掩盖低丰度蛋白的信号，导致后者难以检测。此外，蛋白质的等电聚焦和分子量的变化，例如由于翻译后修饰，会导致蛋白质在凝胶中的迁移不一致，从而影响结果的准确性。2D-DIGE还可能受到凝胶间变异的影响，即使在相同条件下运行，结果可能不同。另外，荧光染料的标记效率和稳定性可能导致定量误差。背景荧光和信号重叠也可能干扰数据分析。为克服这些问题，研究人员需不断优化实验流程，使用更先进的设备和更高效的方法。

百泰派克生物科技提供高质量的2D-DIGE蛋白质组学服务，致力于为客户提供从样本准备、实验设计到数据分析的全方位支持。我们的团队由经验丰富的科学家组成，利用先进的技术手段和专业的知识，确保客户研究的精确性和可靠性。选择百泰派克，您将获得定制化的解决方案，助力您的科学研究和创新发现。我们期待与您合作，共同推进蛋白质组学领域的发展。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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