蛋白纯度是生物制药、蛋白质组学及基础生命科学研究中的核心质量指标。伴随生物制品开发与蛋白药物上市的加速推进，蛋白纯度分析技术也不断演进。目前，常用的分析技术包括SDS-PAGE、液相色谱（RP-HPLC与SEC）、毛细管电泳（CE）、质谱（MS）和紫外-可见光光谱（UV-Vis）。

一、SDS-PAGE

SDS-PAGE是经典的电泳方法，利用蛋白在聚丙烯酰胺凝胶中根据分子质量迁移的特性实现分离，广泛应用于蛋白纯度的初步评估。

1、优点

SDS-PAGE具有操作简便、成本低廉、检测结果直观的优势。其染色灵敏度高，能够检测到纳克级别的蛋白，即使在样品量有限的条件下也能获得可靠结果。由于其结果直观，科研人员能够快速初步判断蛋白样品是否含有杂质。此外，SDS-PAGE的普及度高，实验室基础设备即可胜任，适合大多数实验室初步筛查使用。

2、缺点

SDS-PAGE也存在局限。其分辨率有限，难以分离分子量相近的蛋白，特别是对复杂样品中的微小杂质识别能力不足。此外，染色和脱色步骤复杂，易引入人为误差，导致半定量结果偏差。该方法对不同样品的适应性不强，对于需要高灵敏度和高分辨率检测的研究或生产过程，其能力明显不足。

二、液相色谱（RP-HPLC与SEC）

液相色谱技术（包括反相高效液相色谱和尺寸排阻色谱）在蛋白纯度分析中已成为主流方法之一。RP-HPLC利用疏水作用力分离蛋白，SEC则基于分子大小进行分离。

1、优点

液相色谱具有高分辨率和良好的定量能力，适合复杂样品的分析。RP-HPLC尤其适合疏水性蛋白和多肽，检测灵敏度高，可实现微克级别蛋白的分离检测。SEC则能评估蛋白聚集和单体状态，是质量控制中的重要手段。此外，液相色谱仪器自动化程度高，支持高通量分析，可显著提升实验效率和结果重现性。该方法还能够与多种检测器联用（如质谱），为后续深入分析奠定基础。

2、缺点

液相色谱设备昂贵，维护和操作复杂，且样品前处理要求严格。RP-HPLC采用高有机溶剂可能导致蛋白结构破坏，从而影响功能和纯度评估；SEC分辨率相对较低，对于分子量接近的蛋白分离效果不理想。此外，该技术对操作人员的技能要求较高，需要合理设计梯度和流速，优化分离条件，以获得理想结果。

三、毛细管电泳（CE）

毛细管电泳以其高分辨率和自动化程度著称，近年来在蛋白纯度分析中的应用逐渐增多，特别是在生物制药领域。

1、优点

CE具有极高分辨率，能够区分电荷、大小或构象不同的蛋白，适合复杂混合物的分离分析。其样品消耗量极低，适合痕量样品分析，且分析速度快，有利于提高实验室工作效率。自动化平台可以减少人为误差，提高数据一致性与可重复性。此外，该技术对检测限要求高、检测范围宽，特别适合需要高灵敏度与精密度的蛋白纯度检测。

2、缺点

CE技术对样品缓冲体系和条件的敏感性较高，实验前需进行严格优化以确保分离效果。部分蛋白可能因构象或电荷特性差异导致分离困难。尽管自动化程度高，但设备价格较高，对实验室环境和操作人员培训有较高要求。此外，CE方法在大规模样品处理上的通量和适应性相较液相色谱有限。

四、质谱（MS）

质谱技术是生命科学研究中蛋白质定性和定量分析的核心工具之一，尤其在复杂样品的蛋白纯度与结构表征中展现出独特优势。

1、优点

质谱具有极高的灵敏度和分辨率，能够检测到极低丰度的蛋白杂质，并提供详细的分子质量、翻译后修饰和异构体信息。通过与液相色谱联用（LC-MS），可在复杂样品中实现高效分离与高精度定量，适合对目标蛋白进行深入解析。此外，质谱能够揭示蛋白结构信息，如肽段序列、糖基化位点和氧化修饰等，为蛋白药物开发和质量控制提供强大支持。

2、缺点

质谱分析对样品前处理和仪器维护要求极高，且数据分析需依赖复杂的软件和经验丰富的分析师。设备投资成本高，维护费用和运行成本亦不容小觑。质谱分析通常需要与液相色谱等技术结合，增加了整体流程的复杂度和耗时。此外，不适合作为快速筛查手段，仅适用于对蛋白质纯度和结构有深入需求的应用场景。

五、紫外-可见光光谱（UV-Vis）

UV-Vis技术因其简单、快捷，常被用于蛋白定量及粗略纯度评估，在实验室日常检测中依然占据一席之地。

1、优点

该方法快速、经济，无需复杂样品制备，可直接测量蛋白在280nm处的吸光值，估算蛋白浓度和初步纯度。设备普及度高，适用于大量样品的初筛。对科研人员而言，UV-Vis几乎无需专业培训，即可完成蛋白初步检测，便于后续实验安排。

2、缺点

UV-Vis对目标蛋白和杂质的区分能力差，检测结果往往为间接推测。若样品中含有核酸或其他共吸光物质，结果会出现显著偏差。此外，该技术灵敏度和特异性均较低，无法满足对高纯度要求的实验与质量控制，尤其在复杂混合样品中，其局限性尤为突出。

蛋白纯度分析技术多样，各有侧重。实际应用中需结合样品类型、研究目标、分析需求与预算综合选择。SDS-PAGE适合初步筛查，液相色谱和毛细管电泳可满足高分辨率和定量需求，质谱适合深入解析和复杂样品分析，UV-Vis则适用于快速初筛。科研与工业界常将多种技术结合使用，以获得全面、准确的蛋白纯度评估结果。在生物医药和蛋白组学研究飞速发展的今天，百泰派克生物科技持续关注蛋白质分析技术的最新进展，致力于为科研人员和企业提供高质量、专业化的HPLC测定蛋白纯度服务。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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