测量蛋白质的分子量是生物化学研究中的一个关键步骤，它帮助科学家了解蛋白质的结构、功能以及与其他分子的相互作用。蛋白质分子量的测定对蛋白质的纯化、功能研究以及药物开发具有重要意义。蛋白质的分子量通常以道尔顿（Da）为单位表示，1道尔顿等于一个氢原子的质量。测量蛋白质分子量的方法繁多，各自有着独特的原理和适用范围。

一、常用的测量方法

1.凝胶电泳

凝胶电泳，尤其是聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），是一种广泛用于测量蛋白质的分子量的方法。通过添加SDS（十二烷基硫酸钠），蛋白质在电场中根据其大小而不是电荷进行分离。SDS-PAGE可相对准确地估算蛋白质的分子量，但需要与已知分子量的标准蛋白进行比较。

2.质谱分析

质谱是一种用于精确测量蛋白质分子量的高效技术。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和电喷雾电离质谱（ESI-MS）是两种常用的质谱技术。质谱通过分析蛋白质离子的质荷比（m/z），能够提供高精度的分子量信息，并且适用于复杂的样品分析。

3.动态光散射

动态光散射（DLS）是一种非侵入性的技术，适用于在溶液中测量蛋白质的分子量。通过测量分子在溶液中的布朗运动，DLS可以推算出颗粒大小，从而间接估算蛋白质的分子量。然而，该方法对样品的纯度和均一性要求较高。

4.超速离心

分析型超速离心利用沉降速度或平衡的方法估算蛋白质的分子量。通过观察蛋白质在离心场中的行为，以及其迁移的速度或位置分布，能够得到蛋白质的分子量信息。该方法适合于研究大分子复合物和蛋白质-蛋白质相互作用。

二、技术步骤与应用

1.样品准备：

确保样品的纯度和稳定性是测量蛋白质的分子量的关键。去除杂质和蛋白质聚集体，可以通过透析、超滤或离心等技术实现。

2.选择合适的方法：

根据实验目标和蛋白质特性，选择最适合的方法。例如，质谱适合于需要高精度结果的实验，而SDS-PAGE则常用于初步分析和筛选。

3.数据分析：

测量完成后，需要进行数据分析和解释。对于质谱，需要使用软件进行质谱图的解析；对于电泳，则需通过标准曲线进行分子量的推算。

4.结果验证：

通过多种方法的结合，验证蛋白质分子量的结果。例如，利用超速离心结果验证DLS的测量结果，或用不同质谱技术进行交叉验证。

这些方法各有优缺点，适用于不同的实验需求。选择合适的技术并结合多种方法，可以提高测量蛋白质的分子量的准确性和可靠性。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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