CRISPR KO 利用CRISPR基因编辑技术对基因组中一定距离的两个靶点进行切割,并通过非同源末端连接(NHEJ)修复机制实现这两个靶点间序列的敲除(Knock out, KO),导致该序列功能丧失。 技术优势: ◉提供高效的设计方案,最小化对邻近基因的影响,确保敲除的特异性。 ◉高效率敲除,并
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CRISPR Indel 通过CRISPR非同源修复产生基因组序列的Indel(small insertion and deletion,即少量碱基的插入和缺失),实现了基因编码区域的移码突变,从而造成基因功能的破坏。 技术优势: ◉适用性广泛:小范围基因编辑,避免敲除对附近相关基因造成影响 ◉敲
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CRISPR KI(Tag) 通过CRISPR和donor质粒(同源臂+插入序列)的共同作用,实现对靶点进行切割的同时,通过HR介导的同源重组修复方式,精确插入外源序列的目的。多适用于内源基因N或C端插入标签基因(Tag),以分析和获取该基因的表达模式。 提供两种技术方案,根据有无筛选标记(mark
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GAL4-UAS转基因 利用attP-PhiC31转基因技术,把外源物种目标基因转入黑腹果蝇基因组,通过GAL4-UAS二元调控系统,让基因在果蝇体内高量表达并进行表型研究。这样,即可利用黑腹果蝇的科研优势,将非模式物种基因功能研究简单化、成熟化和标准化。 全身温控过表达解决方案: ◉技术难题:当G
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P因子随机插入转基因 P因子转基因技术最早由Rubin和Spradling于1982年开发出来,他们将带有正常rosy基因的P因子载体,注射到rosy突变体果蝇(眼色为棕色)的胚胎后,能够从后代中筛选到rosy基因功能恢复的果蝇(眼色正常),证明正常rosy基因被整合到了突变体果蝇的基因组上。
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CRISPR KI(Point Mutation) 在CRISPR和donor(同源臂arm+点突变序列PM)的共同作用下,实现对目标靶点进行切割的同时,通过HR(同源重组)修复,将基因组DNA序列精确替换,造成目的氨基酸点突变。 技术优势: ◉优化了donor质粒序列的设计,在目标氨基酸两侧引入若
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